《實驗動物學(xué)在科研、臨床和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用》

實驗動物病理技術(shù)培訓(xùn)項目

新一代單細(xì)胞水平原位定量雜交技術(shù)及應(yīng)用培訓(xùn)班

2016年7月9日-10日

北京中國科學(xué)院生物物理研究所

【課程背景】

近年來轉(zhuǎn)錄組分析在癌癥研究的廣泛使用已證明，RNA 與蛋白質(zhì)一樣可以作為具有臨床診斷，評估以及治療預(yù)后展望價值的生物指標(biāo)。盡管這種轉(zhuǎn)錄組分析可以找到許多潛在的生物標(biāo)記物，將這些發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化為臨床檢測常規(guī)使用的RNA 生物標(biāo)記物則面臨諸多技術(shù)方面的挑戰(zhàn)。雖然單個細(xì)胞原位檢測和可視化DNA 和蛋白質(zhì)很普遍，直到目前為止RNA 分析最好的常規(guī)檢測手段仍停留在液態(tài)檢測并量化RNA。這些方法只能提供測量細(xì)胞群的一個“平均數(shù)”，掩蓋了RNA 表達在細(xì)胞之間驚人的變異程度。由于其在生理功能中的特殊作用，蛋白質(zhì)一直作為普遍使用的生物標(biāo)記物為疾病治療提供檢測依據(jù)，同時也使得它的檢測技術(shù)得以完善。由于缺乏有效的RNA 原位檢測方法往往導(dǎo)致使用DNA 和蛋白質(zhì)作為替代物來檢測那些最初發(fā)現(xiàn)的RNA 生物標(biāo)記物，然而這種做法存在問題。RNA 表達的變化可能不是源于DNA 改變，也不一定與蛋白質(zhì)水平相同——或者可能沒有相應(yīng)的蛋白相對應(yīng)，例如非編碼RNA?？傊?，利用基因芯片或RNA-seq發(fā)現(xiàn)的RNA 作為生物標(biāo)記物時，最好的方法是直接原位檢測RNA；因為使用DNA 或蛋白質(zhì)替代，或基于溶液的RNA 分析，不可避免地將導(dǎo)致信息丟失，使RNA 生物標(biāo)記物的整體診斷效用大打折扣。

本次高級研修班旨在學(xué)習(xí)和使用新一代單細(xì)胞水平RNAscope原位定量可視化技術(shù)，為生命科學(xué)研究領(lǐng)域的老師和同學(xué)們提供一次高水準(zhǔn)的分子病理學(xué)專業(yè)培訓(xùn)。培訓(xùn)內(nèi)容涵蓋了從傳統(tǒng)原位雜交的發(fā)展介紹到新一代單細(xì)胞水平RNA原位定量可視化技術(shù)的出現(xiàn)；聘請專家對使用RNAscope技術(shù)研究腫瘤、感染性疾病等的分子病理機制方面進行專題講座和學(xué)術(shù)交流；對多色化學(xué)及熒光原位定量雜交技術(shù)原理、圖像采集、數(shù)據(jù)分析等進行專題技術(shù)講解；并設(shè)置了完整的RNAscope技術(shù)現(xiàn)場教學(xué)實踐。采用理論、技術(shù)再到科研中的具體應(yīng)用相結(jié)合的方式，系統(tǒng)、詳細(xì)的介紹RNAscope單細(xì)胞水平原位定量雜交的原理、具體方法等；通過現(xiàn)場原位雜交實驗及圖像采集分析等教學(xué)，使大家真正做到知其然且知其所以然，充分理解并掌握相關(guān)技術(shù)。

【專家介紹】

蔡車國博士

中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所

2010 年至 2011 年于美國杜蘭大學(xué)從事博士后研究工作，研究方向為抗腫瘤多肽合成藥物的篩選與機制研究。2012 年于中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所先后從事博士后和副研究員工作。期間一直從事乳腺干細(xì)胞與乳腺發(fā)育方面的工作，在微環(huán)境因子調(diào)控乳腺干細(xì)胞干性維持的研究中鑒定出一個新的影響乳腺干細(xì)胞自我更新的Wnt信號通路因子 Rspo1，發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊 Genes Dev。在對乳腺干細(xì)胞重要特征基因的鑒定中與他人合作鑒定出乳腺干細(xì)胞的表面分子標(biāo)記Procr，發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊Nature。在細(xì)胞周期蛋白調(diào)控乳腺干細(xì)胞與乳腺發(fā)育中的作用研究中與他人合作鑒定了細(xì)胞周期蛋白CCNY 和 CCNYL1 在乳腺干細(xì)胞和乳腺發(fā)育中的作用，發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊PLoS Genetics。主持國家博士后基金，國家自然科學(xué)基金委青年科學(xué)基金，國家自然科學(xué)基金委面上基金，并以主要負(fù)責(zé)人參與了中國科學(xué)院干細(xì)胞先導(dǎo)項目，重大專項項目，國家 973 項目等多個項目；并為國際干細(xì)胞協(xié)會 ISSCR 會員，Journal of stem cell biology, Research & Therapy 學(xué)術(shù)期刊編委。

報告內(nèi)容：

介紹影響乳腺干細(xì)胞自我更新的微環(huán)境因子的發(fā)現(xiàn)和細(xì)胞周期蛋白在調(diào)控乳腺干細(xì)胞自我更新中的作用機制。以及RNAscope技術(shù)在干細(xì)胞生物學(xué)研究中的應(yīng)用和優(yōu)勢。

宋寧博士

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院上海市生殖醫(yī)學(xué)重點實驗室

上海市青年東方學(xué)者，亞洲男科學(xué)協(xié)會青年委員。從事生殖系統(tǒng)功能及形態(tài)學(xué)研究，綜合利用形態(tài)學(xué)、生物信息學(xué)、分子生物學(xué)等研究方法重點研究精子發(fā)生過程中的組蛋白修飾、lncRNAs功能研究、染色質(zhì)重塑等表觀遺傳學(xué)調(diào)控機制。發(fā)表SCI論文5篇，單篇被引次數(shù)46次，授權(quán)發(fā)明專利1項。第14屆國際組織細(xì)胞化學(xué)會“Young Scientist Best Poster Award”。主持國家自然科學(xué)基金1項，上海市課題3項。

報告內(nèi)容：

原位雜交（ISH）技術(shù)是在組織切片上檢測并觀察特定RNA／DNA分布情況的重要形態(tài)學(xué)方法。在傳統(tǒng)ISH技術(shù)的使用過程中，成功的實驗操作和結(jié)果的評價主要依賴于“熟練”與“必要的對照實驗”。基于我們多年的實際操作經(jīng)驗，本次分享中，介紹ISH的實驗準(zhǔn)備過程、實驗材料的選擇與固定方案、RNA保存狀態(tài)的評價方法、切片時的注意事項。簡述傳統(tǒng)ISH技術(shù)的探針設(shè)計方法和難點，重點介紹創(chuàng)新的RNAscope原位雜交技術(shù)的特點與優(yōu)勢，并結(jié)合實際研究課題展示其染色結(jié)果。

【課程安排】

【主辦單位】

中國科學(xué)院生物物理研究所

北京市實驗動物管理辦公室

北京市實驗動物行業(yè)協(xié)會

【協(xié)辦單位】

Advanced Cell Diagnostics

北京爾瑞醫(yī)療科技發(fā)展有限公司

【時間地點】

2016年7月9日-10日

中國科學(xué)院 生物物理研究所

地址：北京市朝陽區(qū)大屯路15號

【參加人員】

科研人員

【注冊費用】

本次培訓(xùn)班免費

【參加人數(shù)】                 

第一天培訓(xùn)講座，無人數(shù)限***。

第二天實驗操作，由于實驗室容量有限及試劑成本高昂，限20人參加。將根據(jù)報名情況，由主/協(xié)辦方篩選，并通知參加人員。

【說明】

培訓(xùn)班提供午餐，晚餐及住宿自理。

授課期間發(fā)放教材。

參加實驗操作培訓(xùn)的人員在培訓(xùn)完畢后頒發(fā)結(jié)業(yè)******。

【報名聯(lián)系方式】

Email：ccpibp@126.com

聯(lián)系電話： 010-64888424

聯(lián)系人：郝俊峰

歡迎大家踴躍報名參加，現(xiàn)場有精美禮品哦！